PCR是利用DNA在體外高溫(通常約95℃)下變性成單鏈,在低溫下(常為60°C左右),引物根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)的原理與單鏈結(jié)合,然后將溫度調(diào)節(jié)至DNA聚合酶的最佳反應(yīng)溫度(72°C左右)。DNA聚合酶沿著磷酸到戊糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈,具有特異性、靈敏性、得率高、快速、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、易于自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn)。
近年來(lái),PCR試劑廣泛應(yīng)用于食品檢測(cè)、病原體檢測(cè)和癌基因診斷。但PCR試劑對(duì)貯運(yùn)條件要求嚴(yán)格,一般需在-20℃保存,溶液凍融次數(shù)有限制,因此一般需用干冰運(yùn)輸。如果不滿足這些條件,就會(huì)對(duì)PCR試劑的性能產(chǎn)生很大的影響,甚至導(dǎo)致試劑失效。目前,很多實(shí)時(shí)檢測(cè)產(chǎn)品已經(jīng)投放到市場(chǎng)?,F(xiàn)有PCR試劑不易包裝儲(chǔ)存,凍干粉試劑不易定量,不能滿足實(shí)時(shí)檢測(cè)產(chǎn)品的需要。
PCR分子凍干機(jī)將PCR試劑凍干成微球可以解決這些問(wèn)題。
PCR分子凍干機(jī)冷凍干燥是將含有大量水分的物料預(yù)先冷卻冷凍成固體,然后在真空條件下直接使固體水升華,而物料本身則留在凍結(jié)的冰架中,因此其體積保持不變干燥后疏松多孔。在升華過(guò)程中,要吸收熱量,使產(chǎn)品本身的溫度下降,減慢升華速度。為了提高升華速度,縮短干燥時(shí)間,產(chǎn)品必須適當(dāng)加熱。整個(gè)干燥在較低溫度下進(jìn)行,冷凍干燥在低溫下進(jìn)行,因此特別適用于許多熱敏性物質(zhì)。試劑冷凍干燥后,97%以上的水分被去除,而蛋白質(zhì)和微生物不會(huì)變性或失去生物活力。干燥后的產(chǎn)品可在常溫下保存而不會(huì)變質(zhì)。因此,PCR分子凍干機(jī)冷凍干燥技術(shù)在醫(yī)學(xué)上得到了廣泛的應(yīng)用。